Što je čitač mikropločica?
Čitač mikropločica:
ELISA Reader je poseban instrument za enzimski imunosorbentni test. Može se jednostavno podijeliti u dvije kategorije, poluautomatski i potpuno automatski, ali su principi njihova rada u osnovi isti. Njegova jezgra je kolorimetar, odnosno kolorimetrijska metoda se koristi za analizu sadržaja antigena ili antitijela. ELISA mjerenje općenito zahtijeva da konačni volumen ispitne otopine bude manji od 250ul, a test se ne može završiti općim fotoelektričnim kolorimetrom, tako da postoje posebni zahtjevi za fotoelektrični kolorimetar u čitaču mikroploče.
načelo
Čitač mikroploče je zapravo fotoelektrični kolorimetar ili spektrofotometar koji mijenja fazu, a njegovo osnovno načelo rada u osnovi je isto kao i glavna struktura i fotoelektrični kolorimetar. Slika prikazuje dijagram principa rada jednokanalnog čitača mikropločica s automatskim uzorkovanjem. Svjetlosni val koji emitira žarulja izvora svjetlosti pretvara se u monokromatsko svjetlo pomoću filtra ili monokromatora i ulazi u uzorak koji se ispituje u plastični mikroporozni stup. Dio monokromatske svjetlosti apsorbira uzorak, a drugi dio ozračuje kroz uzorak. Na fotodetektoru fotodetektor pretvara različite svjetlosne signale uzorka koji se ispituje u odgovarajuće električne signale. Električni signali se obrađuju pretpojačavanjem, logaritamskim pojačavanjem i analogno-digitalnom pretvorbom, a zatim se šalju u mikro-obradu. Procesor obavlja obradu podataka i izračun, te na kraju prikazuje rezultate na zaslonu i pisaču. Mikroprocesor također kontrolira kretanje mehanizma mehaničkog pogona u smjeru X i Y za pomicanje mikroploče kroz kontrolni krug, kako bi se realizirao proces detekcije automatskog uzorkovanja. Čitač mikropločice služi za ručno pomicanje mikropločice za detekciju, pa su mehanički pogonski mehanizam i upravljački krug u smjeru X i Y izostavljeni, tako da je instrument manji, a struktura jednostavnija.
Metoda imunoenzimskog testa
Metoda imunosorbentnog testa obilježena enzima skraćeno je kao metoda obilježena enzima. To je svojevrsna tehnologija označavanja. To je osjetljiva, specifična, brza i automatizirana moderna tehnologija razvijena iz tehnologije fluorescentnih antitijela i izotopske imunotehnologije.
Osnovno načelo metode označavanja enzima je kombiniranje antigena ili protutijela s enzimskim gel-vezujućim agensom kako bi se dobio enzimski obilježeni antigen ili protutijelo. Ovaj enzimom obilježen antigen ili protutijelo može specifično reagirati s odgovarajućim antigenom ili protutijelom na nosaču čvrste faze ili u tkivu i čvrsto se veže na tlo kako bi formirao imunološke komplekse koji i dalje ostaju aktivni. Kada se doda odgovarajući supstrat, supstrat katalizira enzim da pokaže odgovarajuću reakcijsku boju. Dubina boje izravno je proporcionalna sadržaju odgovarajućeg antigena ili antitijela.
Budući da se ova tehnologija temelji na reakciji antigen-antitijelo i visokoučinkovitoj katalizi enzima, ima visok stupanj osjetljivosti i specifičnosti te je vrlo vitalna tehnologija imunološkog ispitivanja.
